Τι είναι μια ανοσοδοκιμασία με Western blot;

Τι είναι μια ανοσοδοκιμασία με Western blot;
Anonim

Απάντηση:

Το στύπωμα Western (ανοσοκηλίδωση πρωτεΐνης) είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη αναλυτική τεχνική που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση συγκεκριμένων πρωτεϊνών σε ένα δείγμα ομογενοποιημένου ιστού ή εκχυλίσματος.

Εξήγηση:

Τα βασικά στοιχεία που απαιτούνται για την επίτευξη αυτού του στόχου είναι:

  • διαχωρισμό μιγμάτων πρωτεϊνών κατά μέγεθος χρησιμοποιώντας ηλεκτροφόρηση πηκτής.
  • την αποτελεσματική μεταφορά διαχωρισμένων πρωτεϊνών σε ένα στερεό υπόστρωμα.
  • την ειδική ανίχνευση μιας πρωτεΐνης-στόχου με αντιστοίχως αντιστοιχισμένα αντισώματα

Η ικανότητα των κηλίδων western να δείξει σαφώς την παρουσία μίας συγκεκριμένης πρωτεΐνης, τόσο ως προς το μέγεθος όσο και μέσω της δέσμευσης ενός αντισώματος, τις καθιστά κατάλληλες για την αξιολόγηση των επιπέδων έκφρασης πρωτεΐνης στα κύτταρα για την παρακολούθηση των κλασμάτων κατά τον καθαρισμό της πρωτεΐνης.

Σε πολλές περιπτώσεις οι κηλίδες Western χρησιμοποιούνται σε συνδυασμό με άλλες βασικές τεχνικές ανίχνευσης αντισωμάτων, όπως ELISA ή ανοσοϊστοχημεία.