Γιατί είναι απαραίτητο το ίδιο ένζυμο περιορισμού να χρησιμοποιηθεί για την αποκοπή (κοπή) του DNA και των δύο οργανισμών που χρησιμοποιούνται για τη δημιουργία ενός διαγονιδιακού οργανισμού;

Γιατί είναι απαραίτητο το ίδιο ένζυμο περιορισμού να χρησιμοποιηθεί για την αποκοπή (κοπή) του DNA και των δύο οργανισμών που χρησιμοποιούνται για τη δημιουργία ενός διαγονιδιακού οργανισμού;
Anonim

Απάντηση:

Δες παρακάτω…

Εξήγηση:

Τα περιοριστικά ένζυμα κόβονται σε συγκεκριμένες αλληλουχίες, επομένως πρέπει να χρησιμοποιηθεί το ίδιο ένζυμο περιορισμού επειδή θα παράγει θραύσματα με τα ίδια συμπληρωματικά κολλώδη άκρα, καθιστώντας δυνατή τη δημιουργία δεσμών μεταξύ τους.

Υπάρχουν ορισμένες συμβατές τοποθεσίες περιορισμού που μπορούν να χρησιμοποιηθούν μαζί. Τα Xho1 και Sal1 είναι παραδείγματα. Τα κολλητικά τους άκρα ταιριάζουν και έτσι μπορούν να συνδεθούν μαζί. Αλλά η απολίνωση σκοτώνει και τα δύο Xho1 και Sal1, έτσι δεν μπορείτε να χρησιμοποιήσετε κανένα από αυτά για να κόψετε ξανά (στις θέσεις σύνδεσης).

Μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε εξωνουκλεάση ή PCR για να κάνετε τα πιο κολλώδη άκρα (5 ή 3 προεξοχές) σε αμβλύ θέσεις - με αυτόν τον τρόπο μπορείτε να συνδέσετε σε μια αμβλύ περιοχή κοπής - αλλά αυτό θα σκοτώσει γενικά την αμβλύ τοποθεσία, καθώς και.