Το PBR322 είναι ένα πλασμίδιο που έχει δύο θέσεις περιορισμού για το EcoRI, ενώ το ϋΝΑ του φάγου Τ4 έχει τρεις θέσεις περιορισμού για αυτό. Αυτά τα δύο DNA κατεργάστηκαν με ΕοοΚΙ και αφέθηκαν να τρέξουν σε γέλη αγαρόζης. Τι είδους πρότυπο θα επιτευχθεί με το πήκτωμα;

Απάντηση:

Μη έγκυρη ερώτηση, η T4 έχει περίπου 40 τοποθεσίες για EcoR1, όχι 3 …

Το pBR322 έχει μόνο 1 θέση για το EcoR1, μεταξύ του γονιδίου παράγοντα αντίστασης AMP και του γονιδίου TET …

Εξήγηση:

T4 digests: (ευχαριστώ, Springer Verlag!)

εικόνα που λαμβάνεται από τη διεύθυνση

© Springer-Verlag 1981

Αλλά, αν η ερώτησή σας είναι πιο υποθετική:

τόσο τα pBR322 όσο και τα Τ4 γονιδιώματα είναι κυκλικά, έτσι ώστε:

pBR322: 2 κόμβοι = 2 θραύσματα,

T4: 3cuts = 3 θραύσματα.

Με το πήκτωμα αγαρόζης θα δείτε 2 ζώνες στη λωρίδα pBR, 3 ζώνες στη λωρίδα T4, ΕΑΝ 2 ή περισσότερα θραύσματα έχουν ή είναι κοντά στο ίδιο μέγεθος.. Σε αυτή την περίπτωση μεταναστεύουν περισσότερο ή λιγότερο με την ίδια ταχύτητα και θα είναι αδιαίρετοι. Ο σχετικός λόγος G / C προς A / T έχει επίσης αποτέλεσμα …

Έτσι, στο τέλος, εάν τα θραύσματα σε αυτό το υποθετικό παράδειγμα έχουν διαφορετικό μέγεθος, 2 ζώνες για pBR, 3 για T4 …