Τι είναι η SDS-PAGE των πρωτεϊνών;

Τι είναι η SDS-PAGE των πρωτεϊνών;
Anonim

Απάντηση:

Είναι ο διαχωρισμός των πρωτεϊνών με βάση το μοριακό τους βάρος.

Εξήγηση:

SDS-PAGE είναι ο διαχωρισμός των πρωτεϊνών, σε ένα ηλεκτρικό πεδίο, με βάση το μοριακό τους βάρος.

Οι πρωτεΐνες μετουσιώνονται δια θερμάνσεως μεταξύ 70 και 100 ° C παρουσία ενώσεων όπως 2-μερκαπτοαιθανόλης ή διθειοθρεϊτόλης και SDS (δωδεκυλοθειικό νάτριο). Η μερκαπτοαιθανόλη ή διθειοθρεϊτόλη θα διασπάσει τους δεσμούς δισουλφιδίου στην πρωτεΐνη και θα την αναγκάσει να ξεδιπλωθεί και να γίνει γραμμική (όπως μια μακρά αλυσίδα χωρίς πτυχές). Το SDS θα βοηθήσει στη διαδικασία ξεδίπλωσης και θα καλύψει επίσης την πρωτεΐνη με αρνητική φόρτιση.

Το μίγμα στη συνέχεια εφαρμόζεται σε ένα πήκτωμα πολυακρυλαμιδίου (το bit PAGE σε SDS-PAGE) και ένα ηλεκτρικό ρεύμα που εφαρμόζεται. Οι αρνητικά φορτισμένες πρωτεΐνες θα κινηθούν στο ηλεκτρικό πεδίο. Η PAGE θα εμποδίσει τις μεγαλύτερες πρωτεΐνες να κινηθούν πολύ γρήγορα σε σύγκριση με τις μικρές πρωτεΐνες (η PAGE δρα σαν κόσκινο). Το αποτέλεσμα θα είναι ότι οι μεγάλες πρωτεΐνες θα παραμείνουν κοντά στην αρχή της γέλης, ενώ οι μικρές πρωτεΐνες θα έχουν μετακινηθεί περαιτέρω στην PAGE.

Μπορείτε να δείτε SDS-PAGE σε λειτουργία στο παρακάτω βίντεο: